Вся электронная библиотека >>>

 Микробиология молочного производства   >>>

  

 

Микробиологические основы молочного производства


Раздел: Производство

   

МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ БИФИДОБАКТЕРИИ

  

Определение антагонистической активности бифидобактерии.

Антагонистическую активность бифидобактерий определяют методом совместного выращивания на жидких средах с тест-штаммами с последующим высевом на . плотные среды. В качестве тест-штаммов берут 8 штаммов: Ё. coli, S. aureus, Pr. vulgaris, Ps. inirabilis, Kl. pheumonia, Sh. flexneri, Sh. sonnei, Salmon yphimurium.

Тест-штаммы выращивают на скошенном мясопептонном агаре в течение 18—20 ч, затем смывают стерильным физиологическим раствором и. по оптическому стандарту мутности готовят микробную взвесь, соответствующую 10 ед. по стандарту мутности. Из 16—24- часовой культуры бифидобактерий, выращенной на кукурузно-лак- тозной среде, готовят такую же взврсь.

Приготовленные стандартные взвеси каждого штамма бифидобактерий и тест-культур вносят по 1 мл в пробирки с казеиново- дрожжевой средой № 5 или кукурузно-лактозной средой, разлйтой по 9 мл. Контролем служит то же количество микробной взвеси каждого тест-штамма, внесенного в выше названные среды. Посевы инкубируют при 37—38°С в течение 48 ч.,

После двухсуточного выращивания из посевов смешанных культур и контрольных делают десятикратные разведения в физиологическом растворе. Из разведений Ю-5, 10~6 и Ю-7 контрольных посевов и из разведений Ш-3, 10~4, Ю-5 опытных высевают по 0,1 мл суспензии на чашки со средой Эидо для учета энтеробактеркй и с мясопептонным агаром—для стафилококков. Кайлю микробной, взвеси равномерно растирают шпателем по поверхности агар'а и инкубируют при температуре 37± 1°С в течение 24 ч. '

Для оценки степени антагонистического действия бифидобактерий на тест-штаммы подсчитывают колонии тест-микробов, выросших на плотных питательных средах после совместного культивирования с бифидобактериями и в монокультуре. Количество колоний тест; штамма, выросших в монокультуре, принимают за 100%. Вычисляют процент выживших клеток тест-культур в смешанных посевах по сравнению с контролем. Он не должен превышать 1—2%.

Определение ферментативной активности (сбраживания углеводов) бифидобактерий. Определение сбраживания углеводов производят следующим образом. Суточную культуру штамма бифидобактерий, выращенную в жидкой питательной среде (Гисса), разводят до 10~4 в физиологическом растворе.

Микробную взвесь, из указанного разведения вносят по 0,1 мл в пробирки со средой, содержащей углеводы, и в контрольную без углеводов. Посевы инкубируют при температуре 37±1°С в течение 14 сут и просматривают на 3, 5, 7, 10 и 14-е сутки. Реакцию считают положительной, если при наличии роста в пробирке с углеводом цвет меняется из фиолетового на желтый. Реакция отрицательная, если цвет среды не меняется. При замедленной реакции цвет среды меняется лишь на 10—14-е сутки.

Определение органолептических показателей бифидобактерий. Исследуемые штаммы бифидобактерий пересевают с кукурузно-лактозной среды в количестве 5% на стерильное обезжиренное молрко с 0,5% кукурузного экстракта и термостатируют при температуре 37±1°С. Полученную закваску используют дл повторного заквашивания стерильного молока с кукурузным экстрактом, термостатируют при той же температуре. После сквашивания его охлаждают и проводят органолептическую оценку.

Определение газообразования бифидобактерий на плотной питательной среде. Исследуемый штамм бифидобактерий уколом засевают в столбик с плотной питательной средой для культивирования бифидобактерий, содержащей 1,5—2% агара. Посевы термостатируют при температуре 37±ГС в течение 2—3 дней, после чего их просматривают.

Штаммы, которые могут быть отнесены к бнфидобактериям, не должны образовывать газа.- Поэтому в питательной среде по всей линии укола не должно быть трещин и пузырьков,-газа. Исключение представляют штаммы вида В. adolescenis, образующие незначительное количество углекислого газа.

Определение образования каталазы. На предметное стекло с 1—2 каплями 3%-ного пероксида водорода вносят 1 колонию штамма бифидобактерий, выращенного на полужидкой питательной среде. При этом не должно образовываться пузырьков газа, так как бифидобактерии каталазоотрицательные.

Определение отношения культур бифидобактерий к желатину. Способность бифидобактерий не разжижать желатин определяют путем посева исследуемого штамма в пробирку с любой из питательных сред для культивирования бифидобактерий, содержащей вместо агара 10% желатина. Посевы термостатируют при температуре 38±1°С в течение 48 ч. Затем пробирки помещают на одни сутки в холодильник, после чего просматривают. В посевах.не должно быть никаких следов разжижения желатина.

 

 

СОДЕРЖАНИЕ:  ТЕХНОЛОГИЯ И ТЕХНИКА ПРОМЫШЛЕННОГО ПРОИЗВОДСТВА ЦЕЛЬНОМОЛОЧНЫХ И МОЛОЧНОКОНСЕРВНЫХ

ПРОДУКТОВ. БИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ МОЛОЧНОГО ПРОИЗВОДСТВА

 

Смотрите также:

 

бифидобактерии. ЭНДОЭКОЛОГИЯ КИШЕЧНИКА...

С этой целью проведены исследования состава кишечной микрофлоры у 18
Снижение бифидобактерии и лактобацилл (вплоть до неоднократно отмечаемой...

 

Бифидок. Лечебные свойства кефира

Бифидобактерий восстанавливают нормальную флору кишечника, способствуют
а как стало известно из последних научных исследований -даже регулируют...

 

Разговор с лидером казанской молодежной группировки

— Это значит,— объясняет заведующий лабораторией социологических исследований Казанского университета А. Л. Салагаев,— уголовная романтика...

 

Метеотропные реакции

Исследования ученых подтверждают особую роль физической тренировки в повышении устойчивости человека к низким температурам, перегреванию...

 

Симптоматику со стороны органов пищеварения...

При ультразвуковом исследовании печени отмечено увеличение ее левой доли.
энтеробактерий наряду со снижением количества бифидобактерий и лакто-бактерий...