Вся электронная библиотека >>>

 Микробиология молочного производства   >>>

  

 

Микробиологические основы молочного производства


Раздел: Производство

   

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ИНГИБИРУЮЩИХ ВЕЩЕСТВ МОЛОКЕ

  

 

Для определения содержания или обнаружения антибиотиков в молоке применяются косвенные и прямые методы, ( При косвенных методах больному животному вводят препараты ибиотиков, содержащие красящие вещества, которые вместе с нбиотиками выделяются из вымени в молоко и придают ему хатериый цвет. К красителям предъявляются следующие требова: обладать такой же стойкостью, как и антибиотики; не быть витыми ни для людей, ни для животных; выделяться вместе с оком с той же скоростью, что и антибиотик; обладать такой краей способностью, чтобы легко обнаруживаться даже при больразведениях; не оказывать отрицательного действия на антитик.

В качестве красящих веществ используют хлорофилл, флюорес, краску зеленый BS (мононатриевая соль 4-4-ди-2-гидроксидисульфонафтилкарбонилангидрида). Прямые методы можно разделить на химические и микробиолоеские. Химические методы специфичны, но недостаточно чувстёльны. Наиболее совершенные химические методы позволяют еделить около 0,1 ИЕ/мл пенициллина. Кроме того, они длительтрудоемки и не могут использоваться для ежедневного контромолока.

Микробиологические методы более чувствительны и позволяют еделить антибиотики в концентрациях, задерживающих развитие роорганизмов.

Сущность микробиологических методов сводится к установлению влияния антибиотиков на развитие микроорганизмов, их биохимическую активность и морфологию. Ингибировать развитие микроорганизмов, в молоке могут не только антибиотики, но и термолабильные естественные ингибиторы, содержащиеся в молоке, бактериофаги. Чтобы исключить влияние этих факторов на результаты пробы, рекомендуется предварительное прогревачше исследуемых образцов молока до 80—95°С в течение 2—10 мин. Однако помимо вышеназванных ингибиторов в молоко попадают или вносятся в  целях фальсификации (для задержки .нарастания кислотности) различные дезинфицирующие и консервирующие вещества,' которые не разрушаются при прогревании образцов молока. Поэтому с помощью микробиологических методов определяют -наличие в молоке не только антибиотиков, но-и термостойких иигиб'ирующих вёществ в целом. Разработанные для обнаружения в молоке пенициллина и других ингибйрующих веществ микробиологическрю методы основаны на ин'гибирующем действии исследуемого молока по отношению к определенным тестгкультурам. Чашечный метод — нанесение пробы в виде полосок, цилиндров и сквозных отверстий; проба на сквашивание — изменение способности к сквашиваниюили окислительновосстановительного потенциала в соответствующей тёст-культуре.

Комбинирование теста на сквашивание с применением окислительно-восстановйтельных индикаторов (метиленового голубого, резазурина, брршлиаитового черного или трифёнрштетразолий хлористого) — в настоящее время наиболее пригодные для практики методы. В результате торможения роста бактерий замедляется изменение окислитёльно-восстаиовительногопотенциала и, следовательно, изменение цвета индикатора.    '

При наличии в молоке ингнбнх веществ содсржымое пробирок будет иметь голубой цвет, пределен не ингибирующих веществ с бром о л пурпуром. Для определения ингибирующих веществ методом используется набор, в который входят: ампулы, сощие В. searohermophilus var. calidobacis в плотной среде:

питательные таблетки, содержащие пептон, глюкозу, сухое молоко и индикатор (бромкрезолпурпур); шприцы для отбора молока, пипетки.

Перед проведением анализа вскрывают ампулы и специальны шприцем вносят в них по 0,1 мл исследуемого, молока и по одной питательной таблетке с индикатороыг. Затем ампулы помещают на водяную баню, в которой Поддерживают температуру 64±2°С, и выдерживают при этой температуре в течение-2,5 ч? После этого ампулы вынимают из водяной'бани и отмечают цвет мо'локач в них. Если цвет молока остается сйреневым, значит, в молоке содержатся антибиотики (в количествах, указанных ниже), . желтый цвет свидетельствует об отсутствии антибиотиков в молоке или их содержании

Определение пенициллина в молоке с помощью бумажных дисков. Метод основан на. методе Галеслота и Хассинга. Бумажные диски пропитывают молоком и помещают на поверхность питательной среды, инокулироваиной В. searohermophilus var. calidolacis, который особенно чувствителен ,к пенициллину. В присутствии в молоке веществ, которые ингибируют рост микроорганизма, вокруг диска образуется четкая зона.

Стандартный раствор пенициллина 100 МЕ/мл готовят растворением натриевой соли бензилпенициллина в стерильной дистиллированной воде. Раствор используют в течение дня, хранят при 5°С.

Раствор пенициллииазы 1000 ед./мл готовят растворением пенициллиназы в стерильной дистиллированной воде. Хранят в холо дильнике при температуре 5°С в течение 2 недель.

10%-ный раствор молока, свободного от ингибирующих веществ, готовят при растворении сухого обезжиренного молока, которое предварительно проверено на отсутствие ингибирующих ве£цёств.

Для анализа можно использовать свежее молоко. Его разливают в бутылки, нагревают в течение 1 ч при 100иС и хранят в холодильнике при 5°С не более 1 недели.

Тест-культуру В. searohermophilus var. calidolacis поддерживают на косом агаре. Перевивку культуры выполняют петлей, посевы выдерживают в термостате при 55± ГС 48 ч. После термостатирования резиновую пробку заливают и плотно закрывают. В таком виде культуру сохраняют в течение нескольких месяцев в холодильнике при температуре 5°С.

10 мл культуралыюй среды асептически переносят в стерильную колбу Эрленмейера вместимостью 150 мл. Инокуляцию культуральной среды производят петлей культуры, взятой с косого агара, или используют жидкую 36-часовую культуру. Тсрмостатирование проводят при 55°С в течение 16—18 ч.

Одну часть свежеприготовленной жидкой культуры смешивают с пятью частями расплавленной агаровой среды при 55±1°С в пробирке или бутылке.

Полученную смесь заливают в стерильную чашку Петри, предварительно подогретую до 55°С, таким образом, чтобы слой агара в чашке был толщиной не более 0,8—1,0 мм. Переносят чашки Петри | ка холодную горизонтальную поверхность для застывания агара. Чашки используются в тот же самый день, допускается хранение в холодильнике в полиэтиленовом пенале 5—7 дней при температуре 5°С.

Рабочий раствор пенициллина готовят, добавляя 1,25 мл стандартного раствора пенициллина к 1000 мл стерильной дистиллированной воды. Этот раствор содержит 0,125 ИЕ/мл. Готовят 50 мл раствора, содержащего 0,0025 ИЕ/мл пенициллина, добавляя к молоку, не содержащему ингибирующих веществ, 1 мл рабочего раствора, и перемешивают. Готовят 50 мл раствора, содержащего 0,005 ИЕ/мл пенициллина, добавляя к молоку, свободному от ингибирующих веществ, 2 мл рабочего раствора, и перемешивают. Растворы готовят в день проведения анализа.

 

СОДЕРЖАНИЕ:  ТЕХНОЛОГИЯ И ТЕХНИКА ПРОМЫШЛЕННОГО ПРОИЗВОДСТВА ЦЕЛЬНОМОЛОЧНЫХ И МОЛОЧНОКОНСЕРВНЫХ

ПРОДУКТОВ. БИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ МОЛОЧНОГО ПРОИЗВОДСТВА

 

Смотрите также:

 

Резистентность и кормовые антибиотики

Давать антибиотики молочным коровам пецелосообразпо, потому что падои молока зге увеличиваются.
Влияние условий содержания четко проявлялось в каждом опыте. Куры-несушки. Опыты по определению роли кормовых добавок...

 

...СОДЕРЖАНИЯ ЖИРА. Жиромер для молока

Для определения содержания жира в молочном мороженом в жиромер для молока отвешивают с точностью до 0,01 г 5 г мороженого и добавляют около 16 мл серной кислоты (плотность 1,5—1,55) так, чтобы уровень жидкости был на...

 

...о химии и классификации антибиотических веществ

Учитывая современное состояние наших зпаний и основываясь на определениях Вруннера и Машека [14], а также Цепера [126], антибиотиком можно
СОДЕРЖАНИЕ: Минеральные вещества, витамины, биостимуляторы в кормлении животных.

 

Накопление остатков антибиотиков в теле животных

Накопление антибиотиков в продуктах животного происхождения возможно лишь в результате всасывания активных веществ в кишечнике
В молоко стрептомицин не попадает; появление антибиотика в молоке возможно при инъекции в вымя.

 

Молоко. Употребление человеком в пищу молоко. Молоко...

Из всех регулярно потребляемых человеком пищевых веществ молоко содержит наибольшую концентрацию радионуклидов причем даже кипячение не уменьшает их концентрацию.

 

...веществах. Метод, основанный па определении...

У молочных коров и птицы в качестве мерила потребности служит величина балапса с поправкой на продукцию (молоко и яйца). Для определения потребности при поддерживающем уровне кормления стремятся уравновесить поступление веществ в...

 

Примеси в травяных кормах - ...и эстрогенные вещества

Высоким содержанием дубильных веществ (до 7...9 %) отличаются скармливаемые
После поедания желудей коровами молоко их приобретало горький вкус.
Для определения наличия токсичных веществ применяют химические анализы, а также...

 

Определение активности антибиотика

4.1.7. Определение активности антибиотика. Для количественного определения активности антибиотических веществ, содержание которых часто сравнительно низко, существуют различные биологические, а также химические и физические методы.